EZTrans細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑作為新一代的轉(zhuǎn)染試劑,其轉(zhuǎn)染原理是帶正電的陽離子聚合物與核酸中帶負(fù)電的磷酸基團形成帶正電的復(fù)合物后與細(xì)胞表面帶負(fù)電的蛋白多糖相互作用,并通過胞吞作用進入細(xì)胞。本產(chǎn)品經(jīng)過李記生物的優(yōu)化處理,具有轉(zhuǎn)染效率高,細(xì)胞毒性低,操作簡單,重復(fù)性好,適用范圍廣等特點。...
分子生物學(xué)的發(fā)展使得大量致病基因被鑒定,科學(xué)家在這些研究成果的基礎(chǔ)上發(fā)展了基因治療。基因治療是利用基因載體將治療基因?qū)牖颊唧w內(nèi),進而表達功能蛋白以達到治療的目的。基因治療傳遞DNA面臨的挑戰(zhàn)之一是外源治療基因會被體液和胞外空間的核酸內(nèi)切酶降解。治療基因在目標(biāo)組織中的選擇性積累、細(xì)胞內(nèi)化以及從溶酶體逃逸這些問題對所有核酸治療劑都是需要克服的。DNA必須輸送至細(xì)胞核以允許獲得轉(zhuǎn)錄和表達。因此,設(shè)計和制備安全高效的基因載體來壓縮并且保護治療基因以免被核酸內(nèi)切酶降解并延長其在體內(nèi)的...
DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學(xué)研究的主要對象。所以基因組DNA提取實驗是分子生物學(xué)最基本實驗之一。今天若重介紹基因組DNA提取的原理。在接下來的時間了還會介紹動物基因組DNA的提取步驟。DNA.RNA和核苷酸都是極性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有機溶劑,它們的鈉鹽比游離酸易溶于水,RNA鈉鹽在水中溶解度可達40g/L.DNA在水中為10g/L,呈黏性膠體溶液。在酸性溶液中,DNA天然狀態(tài)的DNA是以脫氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于細(xì)...
蛋白酶,顧名思義,降解蛋白的酶,是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵,用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。在RNA提取中,蛋白酶k的作用主要是降解RNA酶,防止RNA的降解。蛋白酶K廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué),藥理學(xué)等科研方面。一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性。一般儲存在-20°C,避光防潮密閉干燥蛋白酶是所有能夠催化分解蛋白質(zhì)的酶類的統(tǒng)稱蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,從林伯氏白色念球菌中純化得到。該酶...
牛血清白蛋白一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因為有些酶在低濃度下不穩(wěn)定或活性低。加入牛血清白蛋白后,它可能起到保護或載體作用,不少酶類添加牛血清白蛋白后能使其活性大幅度提高。對多數(shù)底物牛血清白蛋白而言,牛血清白蛋白可以使酶切更*,并可實現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過1h時,牛血清白蛋白可以使酶更加穩(wěn)定,因為在不含牛血清白蛋白的反應(yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限...
外泌體作為疾病診斷標(biāo)志物的潛在應(yīng)用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統(tǒng)的技術(shù)突破,要將其用于臨床治療,外泌體的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)面臨很大的挑戰(zhàn)。外泌體(exosome)是細(xì)胞分泌囊泡(extracellularvesicles)的一種亞型,存在于生物體液中,并參與多種生理和病理過程。外泌體被認(rèn)為是細(xì)胞間通信的一種新機制,允許細(xì)胞交換蛋白質(zhì)、脂質(zhì)和遺傳物質(zhì)。過去,細(xì)胞分泌的外泌體一度被認(rèn)為只是參與廢物排泄;現(xiàn)在,隨著高通量蛋白質(zhì)組學(xué)和基因組學(xué)的發(fā)展,外泌體被廣泛認(rèn)為是生物體內(nèi)細(xì)胞間短距...
細(xì)胞凋亡與壞死是兩種*不同的細(xì)胞凋亡形式,根據(jù)死亡細(xì)胞在形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)上的差別,可以將二者區(qū)別開來。細(xì)胞凋亡的檢測方法有很多,下面介紹幾種常用的測定方法。根據(jù)凋亡細(xì)胞固有的形態(tài)特征,人們已經(jīng)設(shè)計了許多不同的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測方法。1、光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡(1)未染色細(xì)胞:凋亡細(xì)胞的體積變小、變形,細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,細(xì)胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落。(2)染色細(xì)胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)濃縮、邊緣化,核膜裂解、...
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